微生物限度檢查儀采用不銹鋼金屬材料制成,配有內(nèi)置進(jìn)口隔膜液泵,不需外接抽濾瓶,液體直接通過(guò)隔膜液泵排除,減少了抽濾瓶使用上的繁瑣,避免了連接不好造成抽濾速度慢等缺點(diǎn)。工作原理是將供試品注入微生物限度培養(yǎng)器內(nèi),通過(guò)檢驗(yàn)儀自帶內(nèi)置進(jìn)口隔膜液泵負(fù)壓抽濾,將供試品中微生物截留在濾膜上,用取膜器取出濾膜,轉(zhuǎn)移至配置好的固體培養(yǎng)基上,菌面朝上,平貼。蓋上蓋子形成封閉的培養(yǎng)盒,置于相應(yīng)的恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)并計(jì)數(shù)。以下內(nèi)容解答微生物限度檢查儀檢測(cè)時(shí)的常見(jiàn)問(wèn)題:
一、梭菌檢查中需置厭氧條件下培養(yǎng)48小時(shí),是否指在厭氧培養(yǎng)箱中?
答:需要在厭氧培養(yǎng)裝置中進(jìn)行培養(yǎng),未必是厭氧培養(yǎng)箱。
二、常規(guī)的監(jiān)督抽樣檢品(包括原料)在進(jìn)行微生物限度檢查時(shí),是否要進(jìn)行活螨檢查并在原始記錄與報(bào)告書(shū)中體現(xiàn)?
答:需要進(jìn)行檢查??梢栽谠加涗浿畜w現(xiàn),報(bào)告書(shū)上可以不出現(xiàn),除非當(dāng)發(fā)現(xiàn)有活螨檢出。
三、包裝材料的大腸埃希菌檢查?
答:根據(jù)包裝材料的不同,大腸埃希菌的檢查方法大致有兩種,一種是將浸提液合并后,取一部分,接種膽鹽乳糖培養(yǎng)基進(jìn)行檢查;另一種是將浸提液合并后,薄膜過(guò)濾,然后按規(guī)定的方法檢驗(yàn)。
四、藥包材微生物限度檢查規(guī)定了合格質(zhì)量水平,通常產(chǎn)量下取樣8個(gè),要求8個(gè)瓶子均符合規(guī)定,如何進(jìn)行?
答:每個(gè)瓶子分別進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
五、控制菌檢查方法驗(yàn)證時(shí),采用多種方法均未檢出控制菌,如何處理?
答:在確保所使用的各種方法都沒(méi)有錯(cuò)誤的情況下,如果仍無(wú)法使試驗(yàn)菌生長(zhǎng),則應(yīng)該采用薄膜過(guò)濾法進(jìn)行檢查。理由是該方法能夠大程度地去除產(chǎn)品的抑菌作用。
六、大腸埃希菌具體操作規(guī)程?
答:參見(jiàn)藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。
七、動(dòng)物組織及動(dòng)物類原藥材的提取物入藥,是否需要檢沙門(mén)菌?
答:需要進(jìn)行沙門(mén)菌檢查。
八、制劑通則中,沒(méi)有微生物檢查項(xiàng)目的,是否可不進(jìn)行微生物項(xiàng)目檢測(cè)?
答:可以。主要是二部制劑通則中口服片劑、膠囊劑、丸劑和顆粒劑。
九、在細(xì)菌、霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)中,適用性檢查細(xì)菌是培養(yǎng)48小時(shí),霉菌和酵母菌是培養(yǎng)72小時(shí),供試品檢查中細(xì)菌是培養(yǎng)3天,霉菌和酵母菌是培養(yǎng)5天,那方法驗(yàn)證中應(yīng)參照哪個(gè)時(shí)間進(jìn)行培養(yǎng)。
答:應(yīng)按照供試品檢驗(yàn)時(shí)的條件,即細(xì)菌3天,霉菌和酵母菌5天。
十一、關(guān)于藥典菌落計(jì)數(shù)結(jié)果的判斷還存在疑義,望能舉例說(shuō)明。
答:不清楚所指的存在疑義是指哪方面。2010年版對(duì)結(jié)果報(bào)告進(jìn)行了較大篇幅的修訂,目前的規(guī)定應(yīng)該比05版為清晰、明確。
十二、需做沙門(mén)菌檢驗(yàn)樣品量的確定?
答:10g(ml)用于樣品計(jì)數(shù)檢驗(yàn)和其他控制菌檢查,10g(ml)用于沙門(mén)菌檢查,10g(ml)
用于沙門(mén)菌檢查的陽(yáng)性對(duì)照。需要進(jìn)行沙門(mén)菌檢查的樣品,檢驗(yàn)用量應(yīng)為30g(ml)。
十三、日常的實(shí)驗(yàn)室裝備能否達(dá)到梭菌無(wú)氧的培養(yǎng)要求?
答:可以??梢圆捎脜捬跖囵B(yǎng)盒(罐)。
十四、如果一個(gè)產(chǎn)品有兩個(gè)規(guī)格,是否可以取其中之一做陽(yáng)性對(duì)照?
答:每個(gè)規(guī)格均需進(jìn)行陽(yáng)性對(duì)照。
十五、藥品檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范“已做驗(yàn)證試驗(yàn)的供試品,在檢查時(shí)刻不必再做陽(yáng)性對(duì)照"如何理解?
答:該標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范中在無(wú)菌檢查法中規(guī)定“供試品無(wú)菌檢查應(yīng)進(jìn)行陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)",表明不論是否進(jìn)行了方法驗(yàn)證,在產(chǎn)品的每一次檢驗(yàn)過(guò)程中,還進(jìn)行陽(yáng)性對(duì)照。
在控制菌檢查的大腸埃希菌項(xiàng)下,指出“已做驗(yàn)證試驗(yàn)的供試品,在該供試品檢查時(shí)不必再作陽(yáng)性對(duì)照"。該規(guī)定僅適用方法驗(yàn)證與供試品檢查同時(shí)開(kāi)展的情況。2005年版藥典和2010年版藥典在控制菌檢查中均對(duì)陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)有明確規(guī)定,“進(jìn)行供試品控制菌檢查時(shí),應(yīng)做陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)。"產(chǎn)品檢驗(yàn)中應(yīng)以藥典規(guī)定為準(zhǔn)。
十六、藥典中關(guān)于純化水的微生物限度是:細(xì)菌、霉菌及酵母菌總數(shù)每1ml不得過(guò)100個(gè)。這句話的意思是細(xì)菌總數(shù)每1ml不得過(guò)100個(gè),霉菌及酵母菌總數(shù)不得過(guò)100個(gè),是細(xì)菌+霉菌+酵母菌總數(shù)每1ml不得過(guò)100個(gè)。如果是三者總數(shù)的話,那細(xì)菌總數(shù)限度是多少?霉菌及酵母菌總數(shù)限度又是多少?
答:是總數(shù)不得過(guò)100個(gè)。沒(méi)有必要考慮各自的限度值。
十七、無(wú)菌檢查和微生物限度檢查中,產(chǎn)品中規(guī)定的溶解液是否可以換成其他的溶液?
答:可以。
十八、抗真菌藥品的微生物限度檢查法
答:這類產(chǎn)品的霉菌和酵母菌計(jì)數(shù)方法需要進(jìn)行調(diào)整,可以根據(jù)產(chǎn)品劑型的不同,選擇薄膜過(guò)濾法或培養(yǎng)基稀釋法等方法。
十九、為什么在日常樣品檢測(cè)中還需要做陽(yáng)性對(duì)照(國(guó)外不需要)?
答:為了確保每一次檢測(cè)對(duì)可能存在的微生物都是有效的。
二十、對(duì)于同一個(gè)品種,藥典為什么不規(guī)定統(tǒng)一的檢測(cè)方法?
答:本版藥典進(jìn)行過(guò)這樣的嘗試,也有某些品種已經(jīng)收載了統(tǒng)一的檢測(cè)方法,如注射用頭孢類抗生素的無(wú)菌檢查。之所以沒(méi)有大量收載,主要是由于檢測(cè)方法還沒(méi)有經(jīng)過(guò)必要的復(fù)核。
將微生物檢驗(yàn)的統(tǒng)一方法收載在品種的各論項(xiàng)下,始終是努力的方向。
二十一、測(cè)定純化水微生物限度時(shí),每張濾膜過(guò)濾量是多少合適?需要先稀釋嗎?過(guò)濾完后需不需要沖洗?假如我取10ml純化水通過(guò)雙杯體封閉式薄膜過(guò)濾器過(guò)濾,每張濾膜上的計(jì)數(shù)是以5ml為單位還是10ml為單位?
答:過(guò)濾量應(yīng)以培養(yǎng)后出現(xiàn)的微生物數(shù)不超過(guò)100cfu/膜為標(biāo)準(zhǔn)。一般可不稀釋。不需要沖洗。每張濾膜的過(guò)濾量為5ml。
二十二、細(xì)菌數(shù)為100g/g的,樣品稀釋級(jí)只做1:10,1:100的倍數(shù)就可以了嗎?
答:可以。
二十三、培養(yǎng)時(shí)間3天,5天,可理解為72小時(shí),120小時(shí)嗎?
答:可以。這樣為嚴(yán)謹(jǐn)。